单位编号：1
得分：CD20（5分）、CK（5分）、Ki-67（5分）、
问题：无信号。组织形态难以辨认。
原因：染色过程中组织未按正常流程处理。
建议：1、严格按照免疫组化正常流程进行操作。2、如果使用机器染色时，应先进行调试。一抗孵育温度4℃，时间为整夜，或者常温1小时；可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟，如用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。采用碱性修复液EDTA pH8.0或EGTA pH9.0进行修复。显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：18
得分：CD3（11分）
问题：染色太弱。可能影响正常判断。
原因：可能与二抗孵育时间过短或一抗用量较少有关。
建议：二抗孵育温度37℃，时间延长为20-30分钟。严格控制高压修复时间，不宜过长，以免组织飞片。

单位编号：33
得分：CK（12分）
问题：染色较弱。
原因：可能与一抗孵育时间短（32分钟）有关，或一抗与二抗使用不同公司试剂，可能在两家试剂的配合上不理想有关。
建议：用同一家公司的所有试剂。使用机器染色时，应先进行调试。一抗孵育温度4℃，时间为整夜，或者常温1小时；可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟，如用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。采用碱性修复液EDTA pH8.0或EGTA pH9.0进行修复。显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：39
得分：CD3（5分）、CK（12分）、Ki-67（5分）。
问题：CD3、Ki-67无信号，CK染色太弱。
原因：一抗与二抗使用不同公司试剂，可能在两家试剂的配合上不理想，以及显色时间过短、修复时间过长有关。
建议：用同一家公司的所有试剂；由于你们使用的是机器染色，应该与销售机器的商家联系，让他们将机器调试好了再使用。手工染色可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟，如用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。采用碱性修复液EDTA pH8.0或EGTA pH9.0进行修复。显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：45
得分：CD3（12分）、CD20（12分）
问题：染色较弱。
原因：可能与二抗孵育时间过短有关。
建议：二抗孵育温度37℃，时间延长为20-30分钟。严格控制高压修复时间，不宜过长，以免组织飞片。

单位编号：49
得分：CD3（5分）
问题：染色浅，有非特异性着色。
原因：从所有染色切片中，内源性生物素没有完全封闭。
建议：定期监测封闭液，并及时更换，采用高压修复时，应在喷气后2分钟即中止修复。或可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟。

单位编号：57
得分：CD3（11分）
问题：复染过深，影响信号判断。
原因：可能与高压修复时间喷气后4分钟有关，并在苏木素中复染时间过长
建议：用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。或可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟。复染应缩短一半时间。

单位编号：62
得分：CD3（11分）
问题：染色较弱，对比较差。
原因：可能与高压修复时间120℃，5分钟有关。
建议：用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。或可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟。采用碱性修复液EDTA pH8.0或EGTA pH9.0进行修复。

单位编号：65
得分：CD20（9分）
问题：染色太弱。
原因：可能与高压修复时间140℃，1分钟有关。
建议：用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。或可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟。

单位编号：70
得分：CD3（9分）、CD20（5分）、CK（7分）
问题：染色太弱。
原因：可能与二抗没有进行内源性生物素封闭，以及显色时间过短、温度过低有关。
建议：二抗孵育温度提高至37℃，时间为20-30分钟。室温，显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。采用碱性修复液EDTA pH8.0或EGTA pH9.0进行修复。

单位编号：78
得分：CD3（7分）、CD20（8分）
问题：染色弱，有背景。
原因：可能与孵育温度以及显色时过低有关。
建议：应进行内源性生物素封闭10-15分钟；室温或37℃下进行显色，显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：79
得分：CD20（12分）
问题：染色较弱，对比较差，组织部分飞片，细胞内可见空泡。
原因：可能与一抗孵育温度25℃，时间为60分钟有关，高压修复温度过高易导致细胞内空泡。
建议：一抗孵育温度4℃，时间为整夜，或者常温1小时。如用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。或可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟。

单位编号：80
得分：CD3（6分）、CD20（12分）
问题：CD3有非特异性着色，CD3、CD20均存在染色对比较差。
原因：可能一抗孵育温度过短，高压修复时间过长，以及显色温度过长有关。
建议：使用机器染色时，应先进行调试。一抗孵育温度4℃，时间为整夜，或者常温1小时；可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟，如用高压修复，应在喷气后2分钟即中止修复。显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：82
得分：CD20（12分）
问题：染色较弱，对比较差。
原因：从提供的染色方法中，我们推测可能与一抗孵育时间120分钟有关。
建议：一抗孵育温度4℃，时间为整夜，或者常温1小时。

单位编号：89
得分：CK（12分）
问题：信号太弱。
原因：可能一抗孵育温度过长，使用酶消化进行抗原修复，以及二抗孵育温度22℃过低有关。
建议：一抗孵育温度4℃，时间为整夜，或者常温1小时；可以尝试使用微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟。并采用碱性修复液EDTA pH8.0或EGTA pH9.0进行修复。二抗孵育温度提高至37℃，时间为20-30分钟。

单位编号：91
得分：CD20（11分）
问题：染色背景过深。
原因：从提供的染色方法中没有找到明确的原因。我们推测是否与染色过程中，PBS冲洗不彻底、显色时间过长有关。
建议：染色过程中每一步清洗均应进行三次，显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：97
得分：CD3（12分）
问题：染色背景过深。
原因：一抗孵育过夜、室温会影响抗原的曝露，加深背景。还与显色时使用增强剂，并显色时间8分钟有关。
建议：一抗孵育温度4℃，时间为整夜，或者常温1小时；染色过程中每一步清洗均应进行三次，显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：104
得分：CD3（10分）
问题：染色背景过深，无法正确判断。
原因：从提供的染色方法中没有找到明确的原因。我们推测是否与染色过程中，PBS冲洗不彻底、显色时间过长有关。
建议：染色过程中每一步清洗均应进行三次，显色操作应在显微镜下进行，当阳性信号清晰而背景干净时应及时中止显色。

单位编号：112
得分： Ki-67（5分）
问题： 无信号。
原因：微波炉修复90℃，时间为15-20分钟，抗原修复的温度不充足，修复液为柠檬酸盐pH6.0，会降低Ki-67染色的信号强度；容易影响最终的显色强度。
建议：微波修复最高档（水煮沸）3分钟，再用最低档15-20分钟。并采用碱性修复液EDTA pH8.0或EGTA pH9.0进行修复。

单位编号：122
得分： CD20（7分）
问题：CD20信号较弱，染色背景深。
原因：可能与二抗孵育温度25℃，时间为12分钟有关。此外染色背景深，可能与冲洗不彻底或显色时间过长有关。
建议：二抗孵育温度提高至37℃，时间为20-30分钟；染色过程中每一步清洗均应进行三次。