中国病理学工作者委员会免疫组化质控中心

第十九次免疫组化质控活动通知（2015-9）

中国病理学工作者委员会(CCP)

免疫组化研究中心免疫组化质控活动(IHCQC)

【介绍】

中国病理学工作者委员会免疫组化研究中心（CCP-IHCQC）从2004年到2015年进行了18次全国性免疫组化室间质评活动，对提高我国免疫组化质量水平起到了积极地推动作用，并引起了世界知名免疫组化质控组织的关注。2013年3月，第一届全球免疫组化质量控制论坛（EQA）在美国亚利桑那州图森举行，周小鸽主任代表CCP-IHCQC与NordiQC、UK NEQAS和CAP等世界知名免疫组化质控组织共同参与了此次大会并作大会发言，介绍了10年来CCP-IHCQC质控活动的完成情况，获得了与会专家的一致认可；2014年8月应邀前往英国伦敦参加了成立国际免疫组化质控协会筹备会，讨论积极推动国际免疫组化阳性对照标准化、推动分子检测标准化；2015年1月，周小鸽主任代表CCP参与的国际多质控中心共同起草的《国际特设专家委员会建议：诊断免疫组织化学阳性对照标准化》文章正式发表于AIMM杂志（Appl Immunohistochem Mol Morphol 2015;23:1–18）；9月，参加国际IHC EQA研讨会，讨论IHC室间质评（EQA）指导方案及相关议题，预期将在世界范围内规范免疫组化在病理诊断中的使用提供指导和参考。

免疫组化在病理诊断中的作用已经得到全球广泛的认同。由于免疫组化是一个多步骤、多因素决定的实验方法，各实验室采用的组织处理与染色方法不同、抗体克隆号和来源不尽相同，因此染色结果良莠不齐。质差的染色切片可能误导最终的病理诊断，产生严重后果。为了使免疫组化结果达到稳定理想的状态，国内外病理学家在免疫组化标准化和质量控制方面进行了积极地探索，已建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。质量控制分为内部质评和外部质评，内部质评由实验室内部自己进行规范标准化管理完成，外部质评是在实验室之间进行。CCP-IHCQC进行的是外部质评，其主要作用是能够了解实验室之间的质量差异，及时发现问题，纠正错误，同时，发现和推广理想的、标准化的染色方法，推动我国免疫组化在病理诊断中的应用与发展。
为了进一步提高免疫组化质量，同步探讨我国免疫组化质量控制和标准化问题，CCP-IHCQC决定进行第19次免疫组化室间质评活动，以推动我国病理事业的发展，欢迎有兴趣的病理同仁参加。

【目的】

为了改善和提高我国免疫组化质量，使我国免疫组化技术更规范化，免疫组化结果更具有可信性和可比性，最终达到提高病理诊断的目的。

【原则】

1、自愿开放原则：在中国大陆或港澳台等地区的任何参加免疫组化活动的病理实验室或其它实验室都是自愿的，没有任何行政约束。

2、客观公正原则：免疫组化室间质评活动是一项专业性和科学性很强的活动，对结果的评价必须是客观的、公正的，不受任何经济和行政利益的影响。为了保证这一原则，评委必须由在免疫组化方面造诣较深的专家组成。

【组织机构】

由中国病理学工作者委员会免疫组化质控研究中心（CCP-IHCQC）负责组织此项活动。该中心由主任（周小鸽）和副主任（孟刚、梁英杰、刘勇）负责，吴秉铨和范钦和担任顾问，邀请全国免疫组化专家组成评委。目前评委包括
（按姓氏拼音字母排序）：陈刚（福建）、金木兰（北京）、孔令非（河南）、李文才（河南）、梁英杰（广东）、刘勇（江西）、孟刚（安徽）、倪灿荣（上海）、倪型灏（浙江）、聂秀（湖北）、师永红（内蒙古）、石雪迎（北京）、孙青（山东）、王伟（北京）、王哲（陕西）、阎晓初（重庆）、钟定荣（北京）、周先荣（上海）、周小鸽（北京）、周晓军（南京）。根据具体情况将适当增加人选。
本次室间质评专家组成员有：刘勇（江西）、孟刚（安徽）、周先荣（上海）、周小鸽（北京）、周晓军（南京）、。活动委托北京友谊医院病理科作为活动的技术支持。包括：提供测试用的组织芯片。

【活动时间】

免疫组化室间质评活动每年将举办2次。上半年和下半年各一次。分别在2月中旬和8月中旬发出通知。

【方法】

1、通过互联网、微信等平台同步发布本次免疫组化室间质评通知，其中包括测试方法、注意事项、起止日期、抗体的数量和名称、联系方式，并附免疫组化室间质评参加表（见表）。

2、凡欲参加者必须预先填写免疫组化室间质评参加表（每一种抗体填一张表，每次测试4种抗体），作为注册。可在中国病理学工作者委员会免疫组化质控研究中心网站www.ihcqc.cn注册并直接填写报名表。为了便于联系，希望不用邮寄注册。

3、免疫组化研究中心根据注册情况向参加者邮寄免疫组化测试切片（组织芯片）。
4、参加者收到测试片后按要求对相关抗体进行染色。染色结束后将测试片以及参加者实验室的对照片寄回免疫组化研究中心，以便评议和了解参加者单位的组织

固定情况。

5、免疫组化研究中心邀请评委对参加者测试片进行集体评议。评议内容包括：阳性信号的定位，信号的强度和分布，交叉反应，背景着色，复染情况。评议结果分为4级：优、良、中、差。分别用4分、3分、2分和1分表示。评委的分数之和为最后得分。最后得分的分数越高表明成绩越好。
具体标准是：

1）优：测试片中所有组织染色非常理想或接近理想。即：阳性信号很强，定位准确，分布恰当，没有交叉反应和背景着色。

2）良：测试片中所有组织染色都很好，但是有些背景。

3）中：测试片中所有组织染色普遍太弱，或其中有一个组织出现假阴性或假阳性。

4）差：测试片中所有组织染色非常弱，其中几个组织出现假阴性或假阳性。
得分如果是“差”和“中”，将会建议改善免疫组化方法。

6、在网上（或e-mail）公布测试总体结果，不公布参加者单位名称。
室间质评结果查询：室间质评评审工作结束后，凭个人账号和密码登陆www.ihcqc.cn查询结果（还包括评委对其技术问题的原因分析及相关的改进建议）。

7、通过的单位颁发合格证书。

8、费用：免疫组化研究中心组织的这项免疫组化室间质评活动是一项非盈利性活动，按照国际惯例都要收取少量成本费（包括芯片制作、邮寄、专家评审、资料处理等）以便这项活动能正常进行。经广泛听取意见和CCP常委会讨论决定，每个参加单位每次交纳成本费300元，希望得到大家理解和支持。由于CCP是学术社团，未能申请到开具发票资格，只能开出收据。
汇款请寄（以下两种方式任选，10月27日为截止日期）：

方式一：直接邮寄汇款至：北京市西城区建功北里5区3号楼1209号中国病理学工作者委员会秘书处（邮编：100053），安香菊收。电话： 010-83516648 /18600970672 。

方式二：通过网上汇款方式汇到以下账户
（务必写上附言：单位+姓名+质控费用，以便于查询）

户名：安香菊

开户行：中国建设银行北京白纸坊支行

账号：6227 0000 1478 0170 704

9、室间质评活动的情况介绍、申请表和结果评估见www.ihcqc.cn。

10、若对室间质评活动内容有何疑问，请发邮件至 ccp@ccp.net.cn

【第十八次测试抗体】

1、 p16

2、p53

3、WT-1

4、CA-125

在女性生殖系统肿瘤中，p16、p53、WT-1、CA-125这四种抗体免疫组化有助于女性生殖系统肿瘤诊断和鉴别诊断，本次室间测评活动主要针对这几个指标来评估各实验室在女性生殖系统（卵巢、子宫、宫颈）的免疫组化染色质量和应用能力。

p16

阳性部位：细胞核/胞质

对照： 宫颈鳞癌

p16 (cyclin-dependent kinase inhibitor 2A),由CDKN2A gene编码的抑癌基因。其作用机制主要是在调节细胞周期进程，通过抑制周期素依赖激酶CDK4/6进而抑制Rb从而阻滞G1期细胞进入S期，抑制细胞进行DNA合成进而抑制细胞增殖。在恶性肿瘤中p16可发生突变，从而失去其抑制功能，从而异常高表达。
目前妇科病理免疫组化中，p16可用于以下方面：

1. 鳞状细胞癌的诊断与鉴别诊断（核阳性）

2. 高级别鳞状上皮内病变的诊断与鉴别诊断(核阳性，且上皮全层弥漫阳性）

3. 宫颈源性病变与内膜源性病变的鉴别诊断（宫颈来源的微腺型增生中p16阳性，而内膜来源的微腺型腺癌p16阴性）

p53

阳性部位：细胞核

对照：乳腺癌

p53, （tumor suppressor p53）可在多种组织中检测到，高度保守。主要在生物体内发挥抑癌基因作用。野生型p53通过抑制细胞周期，抑制细胞凋亡，抑制转录因子激活等途径发挥抑癌作用。高级别浆液性腺癌的发生机制中，野生型p53的丢失和突变型p53异常高表达，使p53失去其抑癌作用，导致基因不稳定进而导致DNA非整倍性。宫颈癌的发生机制中，人乳头状瘤病毒HPV可通过编码E6结合p53从而导致其失活，进而促进肿瘤发生发展。
目前妇科病理免疫组化中，p53可用于以下方面：

1. 输卵管及卵巢高级别浆液性腺癌的诊断与鉴别诊断

2. II型子宫内膜癌的诊断与鉴别诊断

3. 子宫内膜浆液性上皮内癌的诊断与鉴别诊断

4. 宫颈癌及其他恶性肿瘤的辅助诊断

WT-1

阳性部位：细胞核

对照：肾母细胞瘤

WT-1（Wilms tumor protein），由11号染色体上的WT1基因编码，在正常泌尿生殖道的发育中起重要作用，在wilm氏瘤中突变失活从而导致该肿瘤发生而得名。其在细胞内可与p53结合从而发挥其抑癌作用。免疫组化检测可在75%的间皮源性良性及恶性肿瘤、输卵管上皮及输卵管/卵巢浆液性腺癌中高表达（核阳性）。

目前妇科病理免疫组化中WT-1可用于：

1． 输卵管/卵巢浆液性腺癌的诊断与鉴别诊断

2． 转移性内膜浆液性腺癌与原发性内膜浆液性腺癌的鉴别诊断（内膜原发常为阴性）

3． 间皮源性辅助标记

4． 卵巢性索间质肿瘤的辅助标记

CA-125

阳性部位：细胞质/细胞膜

对照：卵巢癌

CA-125 (cancer antigen 125, carcinoma antigen 125)又名MUC16，由MUC16基因编码，是粘液糖蛋白家族成员之一。其主要作为肿瘤标记或生物标记在临床血标本和病理学免疫组化中进行检测。在妇科实践中，CA125主要用于卵巢癌的检测。临床通过监测CA125来筛查妇女罹患卵巢癌的风险。
在妇科免疫组化中，CA125主要用于：

1. 卵巢粘液性恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断

2. 卵巢浆液性恶性肿瘤的辅助诊断。

【第十九次测试的组织芯片】

北京友谊医院病理科作为本次活动的技术支持单位，提供组织芯片。

1、每个参加单位共发4张组织芯片，每张芯片有数个微组织，组织中均含有阴性和阳性对照。

2、组织芯片为10%中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，染色前无需烤片，可从脱蜡、水化处理开始，按各实验室自己平日的实际情况进行免疫组化染色。

3、四张组织芯片，按切片标识每张分别染色p16、p53、WT-1、CA-125四种抗体,不得随意自行更改染色其它抗体。

【时间安排】

1.历次活动得到广大病理工作者的大力支持和积极参与，由于参与者较多，组织芯片制备不易而名额有限（限120个单位），请已决定申请参加活动的单位务必于10月27日前在www.ihcqc.cn网站直接注册并完成汇款工作。

特别提示：
为确保本次室间质评活动的有序进行，请各参与单位分别在完成网站注册或汇款工作的次日与质控中心相关工作人员进行确认，CCP免疫组化质控中心将依据网站注册和汇款（两项工作均要完成）先后顺序（前120名）来确定本次室间质评活动参与单位。

2.免疫组化质控研究中心将测试用组织芯片委托快递发至各参加单位，请各参加单位留意微信、网络通知，并注意查收质控切片。

3.请收到组织芯片的单位将染色完成的切片务必于2015年11月18日之前寄往以下地址：（并注明：室间质评切片）

北京市西城区永安路95号（邮编100050）北京友谊医院病理科

侯凯丽 收

电话：010-63139284/136 5100 2026(侯凯丽)

CCP免疫组化质控研究中心免疫组化室间质评活动筹备组

2015年9月