由于免疫组化是一个多步骤、多因素决定的实验方法,各实验室采用的组织处理与染色方法不同。抗体克隆号和来源不尽相同,导致染色结果良莠不齐。为了促进免疫组化结果达到稳定趋近标准化,现将本次室间质评活动抗体建议染色方案公布如下,以供参考。
手工染色流程建议:
染色指标 |
Hepa-1 |
CDX-2 |
CD20 |
Desmin |
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举例克隆号 |
OCH1E5 |
EPR2764Y |
L26 |
GM007 |
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抗原修复 |
EDTA热修复(直接煮沸法/高压法) |
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封闭内源性生物素 |
是(生物素阻断剂 室温 10min) |
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一抗孵育 |
37℃ 60min |
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检测系统孵育 |
No Biotin Polymer-HRP/EnVision |
37℃ 20min |
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DAB |
室温 5min |